離子色譜法是根據(jù)樣品陰陽離子在離子交換劑(固相)和淋洗液(液相)之間的擴(kuò)散系數(shù)有所不同,進(jìn)而使欲測(cè)成分與干擾多組分做到分離出來的一種固-液分離法。該離子交換色譜實(shí)際上是離子交換原理和高效液相柱色譜技術(shù)的有機(jī)融合,已經(jīng)運(yùn)用于無機(jī)化學(xué)離子或有機(jī)化學(xué)離子組分的分離,因而運(yùn)用范圍普遍。
離子色譜法的優(yōu)勢(shì)是:
?、庞兄_放式支持骨架,大分子能夠自由自在進(jìn)去和快速擴(kuò)散,故吸附容量大。
⑵具備親水性,對(duì)大分子的吸附并不大穩(wěn)固,用溫和條件使能夠洗脫,不至于引起蛋白質(zhì)變性或酶的失活。
⑶多孔性,表面積大、交換容量大,回收率高,可用作分離和制取。
離子色譜柱存在的問題剖析:
1、離子色譜柱柱壓上升很有可能的原因分析有:
(1)離子色譜柱過濾網(wǎng)板被沾污,必須換掉。
(2)柱連接頭擰得太緊了,使輸液管端口形變。
(3)PEEK 材質(zhì)的管子切口不平。
2、分離度下降可能性的原由有: 系統(tǒng)有漏泄時(shí)分離度會(huì)下降;分離柱被沾污后柱容量因子 k’值變小;淋洗液類型和濃度 有問題等。
3、死體積變大 分離柱入口處樹脂損失導(dǎo)致死體積變大或樹脂床進(jìn)去空氣使樹脂床產(chǎn)生溝流會(huì)使分離度 降低。若分離柱入口處突然出現(xiàn)間隙,可填沖一些惰性樹脂球以降低死體積的不良影響。
4、保留時(shí)間減少或增加色譜峰保留時(shí)間的發(fā)生變化會(huì)影響被測(cè)組分的定性和容量,因?yàn)樵陔x子色譜分析法中比較穩(wěn)定的保留時(shí)間對(duì)得到準(zhǔn)確、安全可靠的結(jié)論是非常關(guān)鍵的。